Einführung in die HPLC

Basiskurs mit Experimenten

Kurs-ID: 309/23

17.7.2023 - 20.7.2023, Coburg

Themen-Highlights

Grundlagen der HPLC

Apparatur und Bedienung

Methoden- und Säulenwahl

Strategien zur optimalen Trennung

Detektieren und Quantifizieren

Ziele & Inhalte

Ziel des Kurses ist die Vermittlung von Zusammenhängen zwischen Theorie und Praxis der HPLC, verbunden mit praktischen Hinweisen zum apparativen Aufbau, zur Methodenentwicklung, zur Wahl der richtigen Trennsäule und optimaler Betriebsparameter. Die Vor- und Nachteile der verschiedenen Detektoren werden erläutert und demonstriert. Tipps und Tricks für die tägliche Routine sowie Troubleshooting-Hinweise ergänzen das Programm.

Schwerpunkte des Kurses sind:

Grundlagen der HPLC und ihre Anwendung zur Optimierung der Trennung
Trennsysteme (Normal-Phase-, Reversed-Phase-, Ionenpaar-Chromatographie) und Elutionstechniken (isokratische/Gradiententrennung)
Praktika zum „Anfassen“ und Kennenlernen der HPLC-Apparatur, zur Kontrolle von Selektivität und Effizienz und zur quantitativen Auswertung
Praktische Tipps und Troubleshooting
Moderne Packungsmaterialien und Säulentypen
Problemorientierte Säulenwahl (hohe Auflösung, hohe Geschwindigkeit, begrenzte Probemenge, LC-MS Kopplung)
Außersäuleneffekte und ihre Auswirkung auf die Trennung (Probenvorbereitung, Probenlösungsmittel, Probenvolumen, Verbindungskapillaren, Detektor)
Methodenentwicklung und Optimierung in der Reversed-Phase-Chromatographie
HPLC-Detektoren (Funktionsweise und Einsatzbereiche)
Quantifizierung (von der Peakflächenintegration und Kalibrierung zum richtigen Ergebnis)
Diskussion aktueller Trennprobleme und Beantwortung von Teilnehmendenfragen

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Über die Kursleitung

Prof. Dr. Stefan Kalkhof

Kursleitung

Hochschule für angewandte Wissenschaften Coburg

Prof. Dr. Birgit Götzinger

Technische Hochschule Nürnberg

Prof. Dr. Stefan Kalkhof

Kursleitung

Hochschule für angewandte Wissenschaften Coburg

Prof. Dr. Birgit Götzinger

Technische Hochschule Nürnberg

Zeitplan

Montag, 17. Juli 2023
09:30	Begrüßung und Vorstellung der Teilnehmer
10:00	Grundlagen der HPLC, Informationen in einem Chromatogramm, chromatographische Parameter
12:00	Mittagspause
13:15	Die HPLC-Apparatur: Besprechung und Demonstration der einzelnen Komponenten direkt am Gerät
15:00	Praktische Übung zum Aufsetzen einer HPLC-Anlage mit anschließender Testmessung zur Bestimmung von Basiskenngrößen eines Chromatogramms
17:00	Abschlussbesprechung und Diskussion
17:30	Voraussichtliches Ende des ersten Veranstaltungstages
19:00	Ausklang des zweiten Seminartages in informeller Runde auf Selbstzahlerbasis

Dienstag, 18. Juli 2023
9:00	Trennprinzipien (Normalphase, Reversed Phase), Elutionstechniken (isokratisch, Gradient, Wahl der mobilen Phase)
10:45	Grundlagen der HPLC-Methodenentwicklung und -optimierung, Einflussfaktoren auf eine HPLC-Trennung: Selektivität, Trenneffizienz, Auflösung
12:00	Mittagspause
13:15	Praktische Übung zu Reversed Phase Trennung und Elutionstechniken
15:40	Praktische Übungen und Simulationen zu Einflussfaktoren auf eine HPLC-Trennung und zur Methodenoptimierung
17:00	Abschlussbesprechung
17:30	Voraussichtliches Ende des zweiten Veranstaltungstages

Mittwoch, 19. Juli 2023
9:00	HPLC-Detektoren (Funktionsprinzip, Vor- und Nachteile, Einsatzgebiet) und Quantifizierung in der HPLC
11:00	Qualitätskontrolle und Troubleshooting
12:45	Mittagspause
14:00	Demonstration HPLC-Detektoren sowie praktische Übungen zur Quantifizierung
15:30	Praktische Übung/Demonstration zu Maßnahmen der Qualitätskontrolle und Troubleshooting
17:00	Abschlussbesprechung
17:30	Voraussichtliches Ende des dritten Veranstaltungstages

Donnerstag, 20. Juli 2023
9:00	LC-MS Kopplung
11:00	Aktuelle Entwicklungen (2D-LC, UPLC, Core Shell)
12:30	Mittagspause
13:30	Individuelle Fragestellungen: Themen und Vorkenntnisse werden vorab von den Teilnehmern abgefragt
15:00	Praktische Übung/Demonstration zu weiteren Trennmechanismen: u.a. chirale Trennung, Normalphase, Peptidtrennung
17:00	Abschlussbesprechung
17:30	Voraussichtliches Ende der Veranstaltung

Kaffeepausen werden vor Ort ergänzt.

Zielgruppe

Chemiker:innen, Lebensmittelchemiker:innen, andere Naturwissenschaftler:innen, chemisch-technische und biologisch-technische Mitarbeitende, die die HPLC bei der Lösung analytischer Fragestellungen in Forschung und Routine einsetzen möchten