Gebühr folgt
Für Nichtmitglieder
Einführung in die HPLC
Basiskurs mit Experimenten
Kurs-ID: 309/23
Themen-Highlights
Grundlagen der HPLC
Apparatur und Bedienung
Methoden- und Säulenwahl
Strategien zur optimalen Trennung
Detektieren und Quantifizieren
Ziele & Inhalte
Ziel des Kurses ist die Vermittlung von Zusammenhängen zwischen Theorie und Praxis der HPLC, verbunden mit praktischen Hinweisen zum apparativen Aufbau, zur Methodenentwicklung, zur Wahl der richtigen Trennsäule und optimaler Betriebsparameter. Die Vor- und Nachteile der verschiedenen Detektoren werden erläutert und demonstriert. Tipps und Tricks für die tägliche Routine sowie Troubleshooting-Hinweise ergänzen das Programm.
Schwerpunkte des Kurses sind:
- Grundlagen der HPLC und ihre Anwendung zur Optimierung der Trennung
- Trennsysteme (Normal-Phase-, Reversed-Phase-, Ionenpaar-Chromatographie) und Elutionstechniken (isokratische/Gradiententrennung)
- Praktika zum „Anfassen“ und Kennenlernen der HPLC-Apparatur, zur Kontrolle von Selektivität und Effizienz und zur quantitativen Auswertung
- Praktische Tipps und Troubleshooting
- Moderne Packungsmaterialien und Säulentypen
- Problemorientierte Säulenwahl (hohe Auflösung, hohe Geschwindigkeit, begrenzte Probemenge, LC-MS Kopplung)
- Außersäuleneffekte und ihre Auswirkung auf die Trennung (Probenvorbereitung, Probenlösungsmittel, Probenvolumen, Verbindungskapillaren, Detektor)
- Methodenentwicklung und Optimierung in der Reversed-Phase-Chromatographie
- HPLC-Detektoren (Funktionsweise und Einsatzbereiche)
- Quantifizierung (von der Peakflächenintegration und Kalibrierung zum richtigen Ergebnis)
- Diskussion aktueller Trennprobleme und Beantwortung von Teilnehmendenfragen
Über die Kursleitung
Hochschule für angewandte Wissenschaften Coburg
Technische Hochschule Nürnberg
Hochschule für angewandte Wissenschaften Coburg
Technische Hochschule Nürnberg
Zeitplan
| Montag, 17. Juli 2023 | |
|---|---|
| 09:30 | Begrüßung und Vorstellung der Teilnehmer |
| 10:00 | Grundlagen der HPLC, Informationen in einem Chromatogramm, chromatographische Parameter |
| 12:00 | Mittagspause |
| 13:15 | Die HPLC-Apparatur: Besprechung und Demonstration der einzelnen Komponenten direkt am Gerät |
| 15:00 | Praktische Übung zum Aufsetzen einer HPLC-Anlage mit anschließender Testmessung zur Bestimmung von Basiskenngrößen eines Chromatogramms |
| 17:00 | Abschlussbesprechung und Diskussion |
| 17:30 | Voraussichtliches Ende des ersten Veranstaltungstages |
| 19:00 | Ausklang des zweiten Seminartages in informeller Runde auf Selbstzahlerbasis |
| Dienstag, 18. Juli 2023 | |
| 9:00 | Trennprinzipien (Normalphase, Reversed Phase), Elutionstechniken (isokratisch, Gradient, Wahl der mobilen Phase) |
| 10:45 | Grundlagen der HPLC-Methodenentwicklung und -optimierung, Einflussfaktoren auf eine HPLC-Trennung: Selektivität, Trenneffizienz, Auflösung |
| 12:00 | Mittagspause |
| 13:15 | Praktische Übung zu Reversed Phase Trennung und Elutionstechniken |
| 15:40 | Praktische Übungen und Simulationen zu Einflussfaktoren auf eine HPLC-Trennung und zur Methodenoptimierung |
| 17:00 | Abschlussbesprechung |
| 17:30 | Voraussichtliches Ende des zweiten Veranstaltungstages |
| Mittwoch, 19. Juli 2023 | |
| 9:00 | HPLC-Detektoren (Funktionsprinzip, Vor- und Nachteile, Einsatzgebiet) und Quantifizierung in der HPLC |
| 11:00 | Qualitätskontrolle und Troubleshooting |
| 12:45 | Mittagspause |
| 14:00 | Demonstration HPLC-Detektoren sowie praktische Übungen zur Quantifizierung |
| 15:30 | Praktische Übung/Demonstration zu Maßnahmen der Qualitätskontrolle und Troubleshooting |
| 17:00 | Abschlussbesprechung |
| 17:30 | Voraussichtliches Ende des dritten Veranstaltungstages |
| Donnerstag, 20. Juli 2023 | |
| 9:00 | LC-MS Kopplung |
| 11:00 | Aktuelle Entwicklungen (2D-LC, UPLC, Core Shell) |
| 12:30 | Mittagspause |
| 13:30 | Individuelle Fragestellungen: Themen und Vorkenntnisse werden vorab von den Teilnehmern abgefragt |
| 15:00 | Praktische Übung/Demonstration zu weiteren Trennmechanismen: u.a. chirale Trennung, Normalphase, Peptidtrennung |
| 17:00 | Abschlussbesprechung |
| 17:30 | Voraussichtliches Ende der Veranstaltung |
| Kaffeepausen werden vor Ort ergänzt. | |
Zielgruppe
Chemiker:innen, Lebensmittelchemiker:innen, andere Naturwissenschaftler:innen, chemisch-technische und biologisch-technische Mitarbeitende, die die HPLC bei der Lösung analytischer Fragestellungen in Forschung und Routine einsetzen möchten